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[多选题]

关于PCR引物设计的原理，下列叙述正确的是

A.待扩增片段的序列是已知的，在片段两侧确定引物顺序

B.引物长度一般为15～30个核苷酸，但也可多至50个左右

C.引物中的碱基应随机分布，G＋C的含量宜在45%～55%

D.引物内部不应形成二级结构，避免在链内存在互补的序列

E.可以在引物的3′末端引入特定的酶切位点

参考答案与解析：

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